Area EPR

Risonanza Plasmonica di Superficie (SPR - Biacore)

Applicazioni

Gli ambiti di misura sono tipicamente:

  • Misura di affinità e cinetica di legame;
  • Determinazione quantitativa della concentrazione attiva di un analita;
  • Determinazione della specificità per il substrato;
  • Misure di compliance con un Reference Standard;
  • Determinazione della termodinamica dell’interazione.

Ecco alcuni esempi di approccio sperimentale in ambito cinetico e termodinamico.

Lo strumento può effettuare l’analisi cinetica sia associando e dissociando gli analiti con un intermezzo rigenerativo per tornare esattamente alla baseline o mediante un’analisi sequenziale in cui gli analiti vengono iniettati uno dopo l’altro a concentrazioni crescenti, eccone un esempio, ottenuto testando l’effetto di un analita ad un anticorpo monoclonale.



Sensor chip type Characteristics Examples
General purpose Sensor chips with carboxyl or carboxymethyl groups on the chip surface for ligand attachment. Sensor Chips CM3, CM4, CM5, CM7 and C1
Tagged ligand capture Pre-immobilized with capturing molecules specific for tagged ligands Sensor Chips SA and NTA
NTA Reagent Kit, Biotin CAPture Kit, GST Capture Kit
Antibody capture Pre-immobilized with capturing molecules specific for antibodies. Sensor Chips Protein A, Protein G, Protein L
Human Antibody Capture Kit,
Mouse antibody capture Kit,
Human Fab Capture Kit.
Lipid attachment Hydrophobic surface for attachment of lipid bilayers or liposomes. Sensor Chips HPA, L1
Customizable Unmodified gold surface for preparation of customized surfaces1). Sensor Chip Au
SIA Kit


Come già summenzionato i sensor chip sono un elemento fondamentale del sistema che ne consente l’applicabilità in diversi contesti sperimentali.

Oltre ai già citati sensori della serie CM- ne esistono di altri più adeguati a legare i lipidi e le molecole idrofobiche quali ad esempio micelle e liposomi. Sono appunto i sensori HPA per monolayers lipidici e quelli di tipo L1 con ancore molecolari idrofobiche che consentono di immobilizzare doppi strati lipidici, frammenti di membrane plasmatiche, ecc.

Altri chip più specifici vengono venduti già funzionalizzati per particolari tipologie di molecole legate dagli anticorpi, ad esempio Proteina A, G, L frammenti cristallizzabili, streptavidina, ecc.


1) Customization of unmodified sensor chip surfaces is the responsibility of the user. GE does not provide customization services or support for customized surfaces.