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aree:proteomica:biacore:applicazioni [2022/07/27 19:20] Gianluca Frustagli Aggiunta link al modulo per la richiesta di servizio. |
— (versione attuale) | ||
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| Linea 1: | Linea 1: | ||
| - | ~~NOTOC~~ | ||
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| - | **Area Proteomica** | ||
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| - | ====== Risonanza Plasmonica di Superficie (SPR - Biacore) ====== | ||
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| - | <WRAP tabs> | ||
| - | * [[:aree:proteomica:biacore:richiesta|Richiesta servizio]] | ||
| - | * [[:aree:proteomica:biacore:start|Introduzione]] | ||
| - | * [[:aree:proteomica:biacore:metodica|Metodica]] | ||
| - | * [[:aree:proteomica:biacore:applicazioni|Applicazioni]] | ||
| - | </WRAP> | ||
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| - | ==== Applicazioni ==== | ||
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| - | Gli ambiti di misura sono tipicamente: | ||
| - | * Misura di affinità e cinetica di legame; | ||
| - | * Determinazione quantitativa della concentrazione attiva di un analita; | ||
| - | * Determinazione della specificità per il substrato; | ||
| - | * Misure di compliance con un Reference Standard; | ||
| - | * Determinazione della termodinamica dell’interazione. | ||
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| - | Ecco alcuni esempi di approccio sperimentale in ambito cinetico e termodinamico. | ||
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| - | {{ :aree:proteomica:biacore:ambiti_di_misura.png?600 |}} | ||
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| - | ===== Esempi di test cinetici ===== | ||
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| - | Lo strumento può effettuare l’analisi cinetica sia associando e dissociando gli analiti con un intermezzo rigenerativo per tornare esattamente alla baseline o mediante un’analisi sequenziale in cui gli analiti vengono iniettati uno dopo l’altro a concentrazioni crescenti, eccone un esempio, ottenuto testando l’effetto di un analita ad un anticorpo monoclonale. | ||
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| - | {{ :aree:proteomica:biacore:test_cinetici.jpeg?600 |}} | ||
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| - | ===== Esempi di test termodinamici ===== | ||
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| - | {{ :aree:proteomica:biacore:test_termodinamici.png?600 |}} | ||
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| - | ===== Tipologie di chip messi a disposizione dal produttore ===== | ||
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| - | ^ Sensor chip type ^ Characteristics ^ Examples ^ | ||
| - | | General purpose | Sensor chips with carboxyl or carboxymethyl groups on the chip surface for ligand attachment. | Sensor Chips CM3, CM4, CM5, CM7 and C1 | | ||
| - | | Tagged ligand capture | Pre-immobilized with capturing molecules specific for tagged ligands | Sensor Chips SA and NTA \\ NTA Reagent Kit, Biotin CAPture Kit, GST Capture Kit | | ||
| - | | Antibody capture | Pre-immobilized with capturing molecules specific for antibodies. | Sensor Chips Protein A, Protein G, Protein L \\ Human Antibody Capture Kit, \\ Mouse antibody capture Kit, \\ Human Fab Capture Kit. | | ||
| - | | Lipid attachment | Hydrophobic surface for attachment of lipid bilayers or liposomes. | Sensor Chips HPA, L1 | | ||
| - | | Customizable | Unmodified gold surface for preparation of customized surfaces((Customization of unmodified sensor chip surfaces is the responsibility of the user. GE does not provide customization services or support for customized surfaces.)). | Sensor Chip Au \\ SIA Kit | | ||
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| - | Come già summenzionato i sensor chip sono un elemento fondamentale del sistema che ne consente l’applicabilità in diversi contesti sperimentali. | ||
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| - | Oltre ai già citati sensori della serie CM- ne esistono di altri più adeguati a legare i lipidi e le molecole idrofobiche quali ad esempio micelle e liposomi. Sono appunto i sensori HPA per monolayers lipidici e quelli di tipo L1 con ancore molecolari idrofobiche che consentono di immobilizzare doppi strati lipidici, frammenti di membrane plasmatiche, ecc. | ||
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| - | Altri chip più specifici vengono venduti già funzionalizzati per particolari tipologie di molecole legate dagli anticorpi, ad esempio Proteina A, G, L frammenti cristallizzabili, streptavidina, ecc. | ||
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