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Gianluca Frustagli
Linea 1: Linea 1:
 **Area Microscopia** **Area Microscopia**
  
-====== Microscopia Elettronica ======+====== ​Unità di Microscopia Elettronica ======
  
 <WRAP tabs> <WRAP tabs>
-  * [[start|Servizi]] +  * [[start|Strumentazione]] 
-  * [[Strumentazione]]+  * [[servizi|Servizi]]
   * [[Tecniche]]   * [[Tecniche]]
-  * [[richiesta|Richiesta ​di servizio]] +  * [[richiesta|Richiesta servizio]] 
-  * [[chi_siamo|Chi siamo]]+  * [[chi_siamo|Contatti]]
 </​WRAP>​ </​WRAP>​
  
-{{:​aree:​microscopia:​elettronica:​tem.jpeg?​200 |}} La <wrap em>​Microscopia Elettronica a Trasmissione (TEM)</​wrap>​ permette di ottenere da un campione sufficientemente sottile (<100nm) e dotato di un opportuno contrasto elettronico,​ immagini ad alta risoluzione prodotte da elettroni ad alta energia (fino a 100 KeV) trasmessi su uno schermo fluorescente. +==== Contatti ​====
- +
-Il servizio TEM prevede l'​utilizzo di: +
- +
-  * un microscopio elettronico a trasmissione **Philips EM 208S (FEI)** con sorgente a tungsteno e potere d’ingrandimento fino a 200K, dotato di telecamera **MegaViewII (Olympus Soft Imaging Solutions)** per l’acquisizione delle immagini; +
-  * un ultramicrotomo **LEICA UC6** per il sezionamento dei campioni inclusi in resina epossidica e acrilica. +
- +
-\\ \\ \\ \\ +
- +
-{{ :​aree:​microscopia:​elettronica:​sem.jpeg?​300|}} La <wrap em>​Microscopia Elettronica a Scansione (SEM)</​wrap>​ permette di ottenere, da un opportuno campione, immagini tridimensionali ad alta risoluzione. Il principio su cui si basa questo tipo di microscopio è quello di inviare un fascio di elettroni primari su di un campione reso conduttivo e di raccogliere l'​immagine della superficie indagata. L'​immagine che si ottiene è dotata di una profondità di campo tale da permettere l’osservazione in dettaglio delle caratteristiche morfologiche del campione analizzato. +
- +
-Il servizio SEM è dotato della seguente strumentazione:​ +
- +
-  * un microscopio elettronico a scansione ad alta risoluzione **INSPECT F (FEI)** con sorgente ad emissione di campo e potere d'​ingrandimento fino a 200K, per analisi a livello ultrastrutturale di sistemi biologici quali batteri, parassiti, sistemi cellulari, tessuti. +
-  * gli strumenti necessari alla preparativa dei campioni: Critical Point Drying, Sputtering, Evaporatore di carbone. +
- +
-\\ +
- +
-<WRAP box> +
-==== Storia ​==== +
- +
-//Il servizio di microscopia elettronica è offerto grazie a un accordo di gestione condivisa ​ della strumentazione fra il <wrap em>​FAST</​wrap>​ e i Centri <wrap em>​FARVA</​wrap>,​ <wrap em>​MEGE</​wrap>​ e <wrap em>​TISP</​wrap>​. In tutte queste strutture sono presenti infatti risorse umane e conoscenze provenienti dall’area storica della microscopia elettronica. L’accordo salvaguarda un patrimonio culturale presente da anni in Istituto, consente l’avanzamento del settore della microscopia elettronica e facilita l’ottimizzazione delle risorse.//​ +
-</​WRAP>​ +
- +
-===== Prestazioni ===== +
- +
-L'​unità di Microscopia Elettronica offre le seguenti prestazioni:​ +
-  +
-  * consulenza tecnica per la valutazione della metodica di microscopia elettronica più opportuna da utilizzare in base alla tematica proposta; +
-  * preparazione e osservazione dei campioni: l'​unità di microscopia elettronica gestisce tutte le fasi di preparazione dei campioni in base alla scelta più idonea del metodo di osservazione;​ +
-  * interpretazione dei risultati: le immagini digitali ottenute saranno interpretate,​ in collaborazione con i ricercatori interessati,​ al fine di ottenere più informazioni possibili;​ +
-  * elaborazione delle immagini in tavole. +
- +
-===== Applicazioni possibili ===== +
- +
-  * Microscopia elettronica in contrasto negativo di campioni osservabili a fresco, quali alcuni tipi di macromolecole biologiche, esosomi e organelli cellulari purificati, virus, batteri. =>//​[[.:​galleria:​01|galleria...]]//​ +
-  * Microscopia elettronica a trasmissione di tipo tradizionale per l'​analisi a livello ultrastrutturale di campioni biologici inclusi in resina epossidica. =>//​[[.:​galleria:​02|galleria...]]//​ +
-  * Microscopia elettronica a scansione per l'​analisi a livello ultrastrutturale della morfologia di superficie di campioni biologici opportunamente resi conduttivi. =>//​[[.:​galleria:​03|galleria...]]//​ +
-  * Immunomicroscopia elettronica su preparati a fresco visualizzati al TEM con contrasto negativo/​positivo,​ per la localizzazione di antigeni di superficie mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale. =>//​[[.:​galleria:​04|galleria...]]//​ +
-  * Immunomicroscopia elettronica in pre- e post-embedding su sezioni ultrasottili,​ per la localizzazione di molecole sia intracellulari sia superficiali,​ mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale e visualizzati al TEM. =>//​[[.:​galleria:​05|galleria...]]//​ +
-  * Immunomicroscopia elettronica su cellule intere trattate opportunamente per la localizzazione e la distribuzione di antigeni di superficie mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale e rilevati al SEM tramite segnale degli elettroni retrodiffusi (Z contrast). =>//​[[.:​galleria:​06|galleria...]]//​+
  
 \\ \\
  
-=== Per accedere al servizio è necessario===+<​ifinternet>​ 
 +Per gli utenti esterni all'​ISScontattare uno dei referenti di area per avere una valutazione del lavoro richiesto con una stima dei costi (in base a quanto riportato alla voce '​[[:​tariffario|Tariffario]]'​ di questo sito), quindi formalizzare la richiesta compilando il modulo on-line '​[[richiesta|Richiesta servizio]]'​. 
 +</​ifinternet>​
  
-  - contattare preliminarmente ​il personale dell'​unità di Microscopia Elettronica;​ +<​ifintranet>​ 
-  - compilare ​il modulo ​online ​'**[[richiesta|Richiesta ​Servizio]]**' ​illustrando brevemente ​la problematica scientifica,​ tipologia e numero ​di campioni etc.; +Per il personale dell'ISS: le richieste di prestazione a questa ​unità, già preventivamente concordate contattando le persone ​di riferimento,​ possono essere inviate compilando ​il modulo ​on-line ​'​[[richiesta|Richiesta ​di servizio]]' ​(per il contributo in kind consultare ​la voce '​[[:​regolamento|Regolamento ​di accesso]]'). 
-  - verrà quindi fissato un incontro con il personale dell'unità per discutere le modalità, i costi, la tempistica etc.+</​ifintranet>​
  
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-> **Contatti:​** 
 > [[lucia.bertuccini@iss.it|Lucia Bertuccini]] > [[lucia.bertuccini@iss.it|Lucia Bertuccini]]
 > [[francesca.iosi@iss.it|Francesca Iosi]] > [[francesca.iosi@iss.it|Francesca Iosi]]
 +> [[agostina.pietrantoni@iss.it|Agostina Pietrantoni]]
 > ☎ +39 06 4990 2092 > ☎ +39 06 4990 2092
-> Dove sono: edificio 1, piano C, stanza 67+> Dove siamo: edificio 1, piano C, stanza 67