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aree:microscopia:elettronica:servizi [2018/01/23 14:11] Gianluca Frustagli |
aree:microscopia:elettronica:servizi [2019/05/21 17:09] (versione attuale) Gianluca Frustagli [Unità di Microscopia Elettronica] |
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|---|---|---|---|
| Linea 1: | Linea 1: | ||
| **Area Microscopia** | **Area Microscopia** | ||
| - | ====== Microscopia Elettronica ====== | + | ====== Unità di Microscopia Elettronica ====== |
| - | ===== Strumentazione ===== | + | <WRAP tabs> |
| + | * [[start|Strumentazione]] | ||
| + | * [[servizi|Servizi]] | ||
| + | * [[Tecniche]] | ||
| + | * [[richiesta|Richiesta servizio]] | ||
| + | * [[chi_siamo|Contatti]] | ||
| + | </WRAP> | ||
| - | {{:aree:microscopia:elettronica:tem.jpeg?200 |}} La <wrap em>Microscopia Elettronica a Trasmissione (TEM)</wrap> permette di ottenere da un campione sufficientemente sottile (<100nm) e dotato di un opportuno contrasto elettronico, immagini ad alta risoluzione prodotte da elettroni ad alta energia (fino a 100 KeV) trasmessi su uno schermo fluorescente. | + | ==== Servizi ==== |
| - | Il servizio TEM prevede l'utilizzo di: | + | \\ |
| - | + | ||
| - | * un microscopio elettronico a trasmissione **Philips EM 208S (FEI)** con sorgente a tungsteno e potere d’ingrandimento fino a 200K, dotato di telecamera **MegaViewII (Olympus Soft Imaging Solutions)** per l’acquisizione delle immagini; | + | |
| - | * un ultramicrotomo **LEICA UC6** per il sezionamento dei campioni inclusi in resina epossidica e acrilica. | + | |
| - | + | ||
| - | \\ \\ \\ \\ | + | |
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| - | {{ :aree:microscopia:elettronica:sem.jpeg?300|}} La <wrap em>Microscopia Elettronica a Scansione (SEM)</wrap> permette di ottenere, da un opportuno campione, immagini tridimensionali ad alta risoluzione. Il principio su cui si basa questo tipo di microscopio è quello di inviare un fascio di elettroni primari su di un campione reso conduttivo e di raccogliere l'immagine della superficie indagata. L'immagine che si ottiene è dotata di una profondità di campo tale da permettere l’osservazione in dettaglio delle caratteristiche morfologiche del campione analizzato. | + | |
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| - | Il servizio SEM è dotato della seguente strumentazione: | + | |
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| - | * un microscopio elettronico a scansione ad alta risoluzione **INSPECT F (FEI)** con sorgente ad emissione di campo e potere d'ingrandimento fino a 200K, per analisi a livello ultrastrutturale di sistemi biologici quali batteri, parassiti, sistemi cellulari, tessuti. | + | |
| - | * gli strumenti necessari alla preparativa dei campioni: Critical Point Drying, Sputtering, Evaporatore di carbone. | + | |
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| - | ===== Prestazioni ===== | + | |
| L'unità di Microscopia Elettronica offre le seguenti prestazioni: | L'unità di Microscopia Elettronica offre le seguenti prestazioni: | ||
| Linea 28: | Linea 20: | ||
| * preparazione e osservazione dei campioni: l'unità di microscopia elettronica gestisce tutte le fasi di preparazione dei campioni in base alla scelta più idonea del metodo di osservazione; | * preparazione e osservazione dei campioni: l'unità di microscopia elettronica gestisce tutte le fasi di preparazione dei campioni in base alla scelta più idonea del metodo di osservazione; | ||
| * interpretazione dei risultati: le immagini digitali ottenute saranno interpretate, in collaborazione con i ricercatori interessati, al fine di ottenere più informazioni possibili; | * interpretazione dei risultati: le immagini digitali ottenute saranno interpretate, in collaborazione con i ricercatori interessati, al fine di ottenere più informazioni possibili; | ||
| - | * elaborazione delle immagini in tavole. | + | * elaborazione delle immagini. |
| - | ===== Applicazioni possibili ===== | ||
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| - | * Microscopia elettronica in contrasto negativo di campioni osservabili a fresco, quali alcuni tipi di macromolecole biologiche, esosomi e organelli cellulari purificati, virus, batteri. =>//[[.:galleria:01|galleria...]]// | ||
| - | * Microscopia elettronica a trasmissione di tipo tradizionale per l'analisi a livello ultrastrutturale di campioni biologici inclusi in resina epossidica. =>//[[.:galleria:02|galleria...]]// | ||
| - | * Microscopia elettronica a scansione per l'analisi a livello ultrastrutturale della morfologia di superficie di campioni biologici opportunamente resi conduttivi. =>//[[.:galleria:03|galleria...]]// | ||
| - | * Immunomicroscopia elettronica su preparati a fresco visualizzati al TEM con contrasto negativo/positivo, per la localizzazione di antigeni di superficie mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale. =>//[[.:galleria:04|galleria...]]// | ||
| - | * Immunomicroscopia elettronica in pre- e post-embedding su sezioni ultrasottili, per la localizzazione di molecole sia intracellulari sia superficiali, mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale e visualizzati al TEM. =>//[[.:galleria:05|galleria...]]// | ||
| - | * Immunomicroscopia elettronica su cellule intere trattate opportunamente per la localizzazione e la distribuzione di antigeni di superficie mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale e rilevati al SEM tramite segnale degli elettroni retrodiffusi (Z contrast). =>//[[.:galleria:06|galleria...]]// | ||
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| - | /* DIDASCALIE GALLERIE DI IMMAGINI | ||
| - | |1 |Esosomi isolati da plasma umano| | ||
| - | |2 |Corpo osmiofilico purificato da gametociti di Plasmodium Falciparum in contrasto negativo| | ||
| - | |3 |Adenovirus| | ||
| - | |4a|Particelle di batteriofagi morfologicamente riconducibili alla famiglia Siphovirida| | ||
| - | |4b|Flagelli e pili di Escherichia Coli| | ||
| - | |5 |Cellule MDCK infettate da influenza virus WSN| | ||
| - | |6a|Cellule CaCo-2 infettate con Escherichia Coli| | ||
| - | |6b|Pseudomonas Aeruginosa| | ||
| - | |7 |Sporozoita di Cryptosporidium Parvum| | ||
| - | |8 |Gametocita maschile attivato di Plasmodium Berghei| | ||
| - | |9 |Gametocita femminile di Plasmodium Falciparum| | ||
| - | |10|Particolare di cellule CaCo-2| | ||
| - | |11|Desmosoma tra due cellule CaCo-2| | ||
| - | |12|Mitocondri e reticolo endoplasmatico rigoso di cellule di linfoma di Hodgking L428| | ||
| - | |13|Cellula di linfoma di Hodgking L428 in mitosi| | ||
| - | |14|Tessuto epiteliale da biopsia di colon umano| | ||
| - | |15|Cuticola di Schistosoma Mansoni| | ||
| - | |16|Biofilm di batteri idrocarburoclasti| | ||
| - | |17|Biofilm di Pseudomonas Aeruginosa| | ||
| - | |18|Linea cellulare SHSY5Y derivata da neuroblastoma umano| | ||
| - | |19|Monostrato di cellule CaCo-2| | ||
| - | |20|Cellule CaCo-2 infettate da Escherichia Coli| | ||
| - | |21|Adesione di trofozoiti di Plasmodium Falciparum a cellule endoteliali umane di cervello HBEC 5i| | ||
| - | |22|Schizonte di Plasmodium Falciparum| | ||
| - | |23|Apparato buccale di Schistosoma Mansoni| | ||
| - | |24|Immunomarcatura in contrasto negativo di esosomi| | ||
| - | |25|Immunomarcatura in post-embedding di una proteina nucleare dei gametociti di Plasmodium Berghei| | ||
| - | |26|Immunomarcatura in post-embedding di una proteina nei granuli densi di sporozoiti di Toxoplasma Gondii| | ||
| - | |27|Immunomarcatura in post-embedding di una proteina della parete delle oocisti di Toxoplasma Gondii| | ||
| - | |28|Doppia immunomarcatura in post-embedding di due proteine nei corpi osmiofilici di gametociti di Plamodium Falciparum| | ||
| - | |29|Immunomarcatura in pre-embedding di una proteina del vacuolo parassitoforo di gametociti di Plasmodium Berghei| | ||
| - | |30|Immunomarcatura di superficie di sporozoiti di Cryptosporidium Parvum| | ||
| - | |31|Immunomarcatura di superficie di sporozoiti di Cryptosporidium Parvum| | ||
| - | */ | ||
| - | |||
| - | <wrap em>Le richieste di prestazione a questa unità, già preventivamente concordate contattando le persone di riferimento, possono essere inviate compilando il modulo on-line '[[richiesta|Richiesta Servizio]]'.</wrap> | ||
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| - | > **Contatti:** | ||
| - | > [[lucia.bertuccini@iss.it|Lucia Bertuccini]] | ||
| - | > ☎ +39 06 4990 2092 | ||
| - | > Dove sono: edificio 1, piano C, stanza 67 | ||
