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aree:in_collaborazione:luminex:protocolli [2019/03/22 17:15]
Gianluca Frustagli [Protocollo per preparazione e analisi di mezzi condizionati] 		aree:in_collaborazione:luminex:protocolli [2019/03/22 17:15]
Gianluca Frustagli [Protocollo per preparazione e analisi di mezzi condizionati]
Linea 20: Linea 20:
   - misurare la concentrazione proteica con il metodo Bradford: in ogni caso, si consiglia di conservare anche le informazioni relative al numero di cellule piastrate per l’esperimento;​   - misurare la concentrazione proteica con il metodo Bradford: in ogni caso, si consiglia di conservare anche le informazioni relative al numero di cellule piastrate per l’esperimento;​
   - se necessario, eventualmente,​ è possibile ultracentrifugare il CM per ridurne il volume e così aumentare la concentrazione proteica, usando dei filtri a membrana;   - se necessario, eventualmente,​ è possibile ultracentrifugare il CM per ridurne il volume e così aumentare la concentrazione proteica, usando dei filtri a membrana;
-  - conservare il CM a -80 °C: la migliore opzione è di conservare sia aliquote da 1-2 millilitri ​che alcune da 100-200 µl (utili anche per la determinazione della concentrazione proteica);+  - conservare il CM a -80 °C: la migliore opzione è di conservare sia aliquote da 1-2 ml che alcune da 100-200 µl (utili anche per la determinazione della concentrazione proteica);
   - fornire alla unità di analisi anche un campione di bianco (mezzo di coltura addizionato con gli inibitori se sono stati aggiunti; circa 1 ml);   - fornire alla unità di analisi anche un campione di bianco (mezzo di coltura addizionato con gli inibitori se sono stati aggiunti; circa 1 ml);