Unità di Microscopia Elettronica - Tecniche

Immunolocalizzazione di antigeni

Le tecniche di immunomicroscopia elettronica utilizzate nella nostra facility si basano sulla localizzazione di antigeni mediante l'uso di anticorpi secondari marcati con particelle di oro colloidale. La visualizzazione delle particelle di oro indica l'avvenuta reazione antigene-anticorpo e costituisce un'evidenza  di immunolocalizzazione a livello ultrastrutturale. È possibile utilizzare questa metodica su campioni a fresco di piccole dimensioni che possono essere visualizzati al TEM tramite contrasto negativo; su sezioni ultrasottili di campioni inclusi in resina acrilica (metodo del post-embedding) oppure su campioni fissati e inclusi in resina epossidica solo dopo l'avvenuta reazione antigene-anticorpo (metodo del pre-embedding), per la localizzazione al TEM di molecole sia intra- che extra-cellulari; su campioni biologici carbonati per la localizzazione e la distribuzione di antigeni di superficie mediante la rilevazione al SEM del segnale degli elettroni retrodiffusi (BSE) .


Esempi di applicazione della tecnica di immunolocalizzazione di antigeni


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